page_banner

Deteksyon asid nikleyè fliyoresan valè quantitative Ct - yon paramèt renmen-rayi

Deteksyon asid nikleyè fliyoresan valè quantitative Ct - yon paramèt renmen-rayi

"Nouvo pwogram dyagnostik ak tretman nemoni viris koronè (nevyèm edisyon esè)" itilize valè Ct deteksyon asid nikleyik ≥35 kòm youn nan baz enpòtan pou lage jesyon izolasyon oswa egzeyat.Kidonk, ki sa valè Ct twous deteksyon asid nikleyik la reprezante?Èske valè Ct diferan twous yo konparab?Èske pi ba valè Ct la, se pi bon pèfòmans twous la?
Valè Ct (Threshold Cycle, Ct) se kantite sik PCR lè entansite siyal fluoresans quantitative fluoresans an tan reyèl depase papòt la fikse.Twous deteksyon asid nikleik pran nouvo kouwòn lan kòm yon egzanp.Pou menm reyaksyon an nan menm twous la detekte de echantiyon ki gen viris, A ak B, gwosè a nan valè Ct reprezante, nan yon sèten limit, kantite kopi jèn viral la, se sa ki, chaj viral la.Plis Ct echantiyon B a pi ba, se pi wo chaj viral la.Valè Ct a se envès pwopòsyonèl ak chaj viral la ak enfeksyon li yo.Avantaj ak dezavantaj diferan twous quantitative fluoresans an tan reyèl pa ka jije sèlman pa gwosè valè Ct la, paske valè Ct diferan twous yo pa konparab.Evalyasyon pèfòmans twous la bezwen mezire nan aspè sansiblite (limit deteksyon minimòm), espesifik, presizyon, estabilite, ak aplikasyon dyagnostik.Chak manifakti reyaktif gen pwòp dizwit kalite Art masyal, epi yo gen pwòp pouvwa majik yo nan aplikasyon, kidonk mwen pa pral antre nan detay isit la.
Pou enstriman/sistèm konvansyonèl an tan reyèl PCR quantitative (QPCR), akizisyon de valè Ct ak itilizasyon toupatou yo nan aplikasyon deteksyon patojèn yo abitye pou tout moun.Avèk devlopman endistri a ak avansman teknoloji, ekipman QPCR ak reyaktif yo te rankontre opòtinite ak defi.Yiou Think Tank (Rapò rechèch 2021 sou endistri tès jenetik Lachin nan: Teknoloji) analize ke pifò konpayi nan endistri QPCR peyi mwen an ap fè fas ak pwoblèm komen ki baze sou teknoloji.An repons a pwoblèm sa yo, solisyon yo sitou divize an de kalite: akselere amelyorasyon teknoloji ak deplwaye nouvo teknoloji.
POCT pou dyagnostik molekilè QPCR se youn nan direksyon devlopman endistri a, ak amelyorasyon nan pèfòmans se yon faktè enpòtan pou akselere aplikasyon teknoloji a.Pou ekipman POCT ak yon sèl echantiyon debi QPCR, ki jan yo optimize valè Ct nan paramèt kle nan yon sèl reyaksyon nan R & D?Ekipman an menm, menm sistèm reyaksyon an, ak menm konsantrasyon modèl la, teyorikman pi gwo valè Ct yon sèl reyaksyon, pi ba efikasite anzim nan reyaksyon an.
Nan pwosesis pou amelyore efikasite reyaksyon anzim lan ak optimize valè Ct, yon koub anplifikasyon quantitative fluoresans sik PCR 40 ka analize an premye.Koub anplifikasyon nan figi ki anba a divize an faz background fliyoresan, faz anplifikasyon eksponansyèl, faz lineyè, ak faz plato.Yo nan lòd yo reyalize yon background fliyoresan pi ba, osi lwen ke posib yo fè distenksyon ant li ak valè a fliyoresan nan anplifikasyon eksponansyèl byen bonè, li nesesè yo teste soti nan konpayi asirans lan consommables reyaksyon, tès depistaj konsepsyon pwofonde primè, ak sistèm tanpon reyaksyon.Peryòd anplifikasyon eksponansyèl la se reyaksyon ki pi dirèk nan aktivite anzim, epi li se tou prèv kowòdinasyon pafè ekipman POCT, transpòtè reyaksyon ak reyaktif.Nan moman sa a, kontwòl tanperati ekipman, akizisyon siyal optik ak analiz, biocompatibility konpayi asirans, ak pèfòmans sistèm nan reyaktif bezwen ajiste ak teste nan tout aspè.Finalman, anplifikasyon an antye fini, epi rezilta yo dwe prezante pa yon algorithm done solid pou jwenn yon valè Ct rezonab.
CT liy
Yon ti etap nan optimize valè Ct la se etap inonbrabl nan pèsonèl R & D la.Nan enkyetid ak eksitasyon lajounen kou lannwit, chak fwa "mòn yo ak rivyè yo pa wè okenn kote, Willows yo fè nwa ak flè yo klere epi gen yon lòt vilaj", ki ban nou kouraj ak pasyon pou avanse pou pi devan. ankò.


Tan pòs: 29 septanm 2022